俗話(huà)說(shuō)，巧婦難為無(wú)米之炊。再精妙的技術(shù)，缺乏“原材料”也舉步維艱。在生物制藥領(lǐng)域，難表達蛋白就是這樣一個(gè)“天生反骨的存在”，由于它的產(chǎn)量低，很多獨具潛力的分子止步于早研階段。漢騰生物開(kāi)發(fā)了針對難表達蛋白（Difficult to express protein）的DTEasy工具箱，全面解決難表達蛋白的痛點(diǎn)，助力生物制藥產(chǎn)業(yè)突破瓶頸，氣決泉達。
在生物制藥領(lǐng)域，表達和生產(chǎn)一些難表達的蛋白質(zhì)，如部分單克隆抗體、細胞因子、血液因子、酶、膜蛋白以及復雜結構改造抗體等，一直是個(gè)巨大的挑戰。
難表達蛋白產(chǎn)量低的原因
1、難折疊、結構不穩定或高疏水性
對于以下幾種類(lèi)型：
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分子量過(guò)大、富含二硫鍵的蛋白復合物
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需要復雜糖基化修飾的蛋白
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膜蛋白、金屬蛋白、部分細胞因子等疏水性較高或需要特定配體來(lái)穩定其結構的蛋白
常常難以正確折疊或保持穩態(tài)結構，容易在細胞內形成聚集物，引發(fā)蛋白降解及細胞凋亡。
單抗中也有部分亞類(lèi)產(chǎn)量較低（低于1g/L），主要由于抗體的重鏈和輕鏈的種系或互補決定區的序列問(wèn)題，導致復合物不能有效組裝，形成錯誤折疊或聚集。
2、細胞毒性
蛋白酶和凝血酶的毒性功能在過(guò)表達時(shí)引發(fā)細胞凋亡，導致難以重組表達。
由于難表達蛋白質(zhì)產(chǎn)量受限，很多獨具潛力的分子由于可開(kāi)發(fā)性限制止步于早研階段，非?？上?！
為解決生物制藥產(chǎn)業(yè)長(cháng)期以來(lái)的“沉疴宿疾”，漢騰生物開(kāi)發(fā)了DTEasy難表達蛋白平臺，通過(guò)集成并優(yōu)化表達過(guò)程中的各個(gè)關(guān)鍵階段，成功提高難表達蛋白的產(chǎn)量。
漢騰生物 DTEasy工具箱
復合策略系統解決難表達蛋白的痛點(diǎn)
漢騰生物開(kāi)發(fā)了針對難表達蛋白（Difficult to express protein）的DTEasy工具箱，通過(guò)分子改良、專(zhuān)有載體、優(yōu)選宿主細胞系以及定制化工藝，全面提升難表達蛋白產(chǎn)量。
1
分子改良：
改造序列，提升蛋白穩定性
基于序列分析和蛋白結構預測，通過(guò)引入突變或優(yōu)化氨基酸序列，改善蛋白的三維結構，提高其熱穩定性。
在項目中，我們通過(guò)序列風(fēng)險分析和點(diǎn)突變，成功將細胞池產(chǎn)量提高到原來(lái)的7.6倍，且未引起活性改變。
▲來(lái)源：漢騰生物內部研究數據
2
專(zhuān)有載體：
優(yōu)化載體，提高蛋白合成效率
通過(guò)轉錄組差異表達分析，將與難表達蛋白產(chǎn)量正相關(guān)的順式作用元件插入到載體中，對不同類(lèi)型重組蛋白有100%-400%產(chǎn)量提升。
▲來(lái)源：漢騰生物內部研究數據
3
最佳宿主細胞系選擇：
挑選適配宿主，實(shí)現高效表達
漢騰獨家GlycoExpress人類(lèi)髓系來(lái)源細胞系，專(zhuān)門(mén)用于表達困難的糖蛋白。在GPCR類(lèi)、血液因子、復雜多聚物等重組蛋白表達中，具有更高的產(chǎn)量和與人類(lèi)天然蛋白更相似的糖譜。
▲來(lái)源：漢騰生物內部研究數據
4
定制化工藝：
專(zhuān)有添加劑，最高實(shí)現產(chǎn)量3倍提升
對于培養過(guò)程中對細胞產(chǎn)生一定壓力的蛋白，通過(guò)添加劑增加細胞耐受也可以提升表達量。DTEasy專(zhuān)有添加劑可只需在培養過(guò)程中簡(jiǎn)單的單次添加，即可最高提升3倍表達量。
▲來(lái)源：漢騰生物內部研究數據
綜上，漢騰DTEasy平臺通過(guò)分子設計、載體優(yōu)化、優(yōu)選宿主細胞系以及定制工藝，多管齊下，解決不同類(lèi)型蛋白的難表達問(wèn)題?？蓭椭蛻?hù)釋放高價(jià)值但傳統上難以表達的蛋白質(zhì)的生產(chǎn)潛力，加快開(kāi)發(fā)進(jìn)度，提供設計選擇的靈活性，并最終擴大患者獲得創(chuàng )新生物制品的機會(huì )。